试剂称号：Firefly Luciferase，Recombinant重组萤火虫荧光素酶
储存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋运载。
产地：西安强化生物
CAS：61970-00-1
分子量：~60kDa
景况：液体
一、刻画与基本特色：重组萤火虫荧光素酶是一种通过基因工程妙技抒发的酶，源自北好意思萤火虫（Photinus pyralis）的荧光素酶基因（luc），频繁在大肠杆菌（E. coli）系统中重组抒发。
重组抒发的上风
谨慎性与一致性：比较自然索求的酶，重组手艺扬弃了季节性和地域性互异，确保批次间的高度一致性。
高纯度与活性：典型活性≥1×10¹¹ units/mg卵白，可冻干保存（冻干粉）或以缓冲液形势（液体）提供。
伸开剩余80%工程化修订：部分版块通过基因修饰增强热谨慎性，适用于需长期保存或高温反馈的履行。
【催化机制与生物学功能】
两步催化反馈（依赖ATP、Mg²⁺、O₂）：
(1) 荧光素 + ATP → 荧光素酶 → 荧光素腺苷酸 + PPi
(2) 荧光素腺苷酸 + O₂ → 氧荧光素 + AMP + 光子（λmax=560 nm）
要害辅因子：Mg²⁺谨慎ATP聚拢，钙离子可加快反馈。
生物学功能
解说基因系统：检测运转子活性、转录因子聚拢、miRNA靶向作用。
ATP定量：机灵度达1 fmol ATP（0.2 μg酶）。
活体成像：非侵入性监测基因抒发。
二、坐褥与纯化手艺（一）重组抒发系统
抒发宿主：大肠杆菌。
载体：pET系列，含组氨酸标签便于纯化。
基因起首：北好意思萤火虫，与日本萤火虫基因同源性60-80%。
（二）纯化工艺
L344A突变晋升热谨慎性。
定向进化筛选耐热突变体。
亲和层析：镍柱固定金属离子亲和层析。
收率：约2 mg/L培养液，纯度≥98%。
突变体优化：
L344A突变晋升热谨慎性。
定向进化筛选耐热突变体。
（三）制剂形势
液体：1 mg/mL于Tris-甘油缓冲液，-20℃保存。
冻干粉：含BSA和蔗糖保护剂，复溶于高盐缓冲液。
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西安强化生物提供的关系系列：
mFluor Red 700 酸
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mFluor Violet 540琥珀酰亚胺酯
iFluor 647 alkyne iFluor 647炔烃
ReadiLink mFluor 700抗体秀美试剂盒
iFluor 405 maleimide iFluor 405马来酰亚胺
iFluor 460 maleimide iFluor 460 马来酰亚胺
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iFluor 680 maleimide iFluor 680马来酰亚胺
iFluor 568 maleimide iFluor 568马来酰亚胺
iFluor 514 succinimidyl ester iFluor 514琥珀酰亚胺酯
iFluor 555 succinimidyl ester iFluor 555琥珀酰亚胺酯
iFluor 597 succinimidyl ester iFluor 597 琥珀酰亚胺酯
发布于：陕西省